Методологические подходы к оценке качества
гомеопатических лекарственных средств
растительного и минерального происхождения

Н.А. Ветютнева, О.А. Москаленко
Украина, г. Киев
Киевская медицинская академия последипломного образования им. П.Л. Щупика

Methodological approaches to quality estimation of homoeopathic medicines of vegetative and mineral origin. N.A. Vetyutneva, O.A. Moskalenko (Kiev, Ukraine).
The paper contains experimental results derived from the research for quality estimation methods applied to homoeopathic medicaments of vegetative and mineral origin. The quality estimation is made using the chromatic qualitative tests, chromatographic and spectral analysis methods. Basing upon the derived data, the standard technical documentation for the investigated homoeopathic medicaments can be developed.

Согласно Закону Украины “Про лікарські засоби” (1996), к перечню лекарственных средств, разрешенных к применению в Украине, относятся и гомеопатические препараты, которые в “Держав-ному Реєстрі лікарських засобів” составляют отдельную фармакотерапевтическую группу [2].

С 1981 года в рамках Европейского сообщества действует единая система по оценке лекарственных препаратов, которая состоит в обеспечении единых научных принципов контроля за лекарственными средствами, основными критериями которых являются качество, безопасность и эффективность. Законодательный акт, относящийся к гомеопатическим препаратам, был введен в действие Европейским союзом в 1992 году (директивы 92/73 и 92/74 от 22.09.92) и Европейской фармакопеей в 1996 году. Основные требования к качеству гомеопатических лекарственных средств (ГЛС) учитывают специфику сырья, особенности технологии изготовления и концентрацию активных ингредиентов. Контроль качества включает в себя: анализ исходного сырья, активных ингредиентов, контроль производства и обработки, а также контроль промежуточных и конечных продуктов. Тесты исходных материалов включают подтверждение идентичности на основе соответствующих ботанических, зоологических и химических наблюдений, а также определяют примеси инородных веществ, токсичных металлов, пестицидов, микробного загрязнения. Для активных ингредиентов препаратов растительного и минерального происхождения, которые содержат ядовитые вещества и являются токсичными, требуется анализ, который проводят по самой большой концентрации препарата (исходная матричная настойка или раствор) [3].

Целью наших исследований явилась разработка методологии оценки качества ГЛС растительного и минерального происхождения, а также их гомеопатических разведений, с учетом вышеуказанной «гомеопатической специфики».

Экспериментальная часть
Объектами исследования были гомеопатические матричные настойки (ГМН) Phytolacca (1), Pulsatilla (2), Sabina (3), Thuja (4), Taraxacum (5), а также их гомеопатические разведения (1Д – 3Д) и минеральные соли Argentum nitricum, Kalium bichromicum, Kalium carbonicum в виде матричных растворов и разведений (2Д – 4Д).

Приготовление вышеперечисленных объектов проводилось в соответствии с технологическими требованиями (§1, §3, §5а, §6) изготовления ГЛС [4].

Матричные настойки оценивали по общим показателям качества: описание, плотность, показатель преломления, рН среды, сухой остаток и содержание спирта. Анализ проводили по соответствующим фармакопейным методикам [5,6].

Для идентификации биологически активных веществ (БАВ) использовали реактивы на группы биологических соединений (флавоноиды, тритерпеновые сапонины, кумарины, эфирные масла и т.д.). Данные по проведению теста «идентификация» представлены на примере ГМН Thuja и ее разведений (Таблица 1).

Таким образом, с помощью качественных реакций определяются основные действующие вещества ГМН и их разведений. (На примере Туи – это эфирные масла, тритерпеновые сапонины, флавоноиды и кумарины.)


Таблица 1
Результаты качественных испытаний ГМН “Thuja” и ее разведений

Реактив	H2SO4 (конц.)	Р-р хинина г/хл 1%	FeCl3 3%	AlCl3 1%	Циани- диновая проба	Реакция пено- образо- вания	Ацетат свинца	Р-р КОН 10% + диазо- реактив
Объект исследо- вания
ГМН Thuja	В пробирке 4 зоны: полоса зеленовато-бу-рого цвета; область желто-зеле-ного цвета; полоса темно-вишне-вого цвета; вишневый раствор	Белый аморфный осадок	Зелено-вато-бурое окраши- вание+ ++–	Желтое окра-шивание; в УФ-свете (=365 нм) бирюзовая флюоре- сцен-ция	Оранже- во-коричне- вое окраши- вание	Стойкая пена	Желто-белый осадок	Желто-ко-ричневое окраши- вание, после введения соли диазо-ния раст-вор через 1-2' становится крас-но-коричне- вым
1Д 2Д 3Д	+ + + –	+ + + –	+ – –	+ + + –	+ + + –	+ + + +	+ + + –	+ + + –

Примечание: “+ +” – выраженная реакция
“+” – слабо выраженная реакция
“–” – отсутствие реакции

Качество минеральных солей оценивали по таким показателям, как: описание, растворимость, качественные реакции на катионы и анионы, испытание на чистоту и количественное определение с использованием методик, приведенных в Государственной фармакопее Х издания и в “Руководстве” В. Швабе [4,7].

Хроматографические исследования ГМН проводили на бумаге для хроматографирования (“Filt-rak FN-1”) и в тонком слое сорбента (пластинки “Silufol UV-254”), с использованием более двадцати хроматографических систем. Следует отметить, что наиболее оптимальные системы для хроматографирования - системы хлороформ–метанол–вода (65:30:10), бензол–этилацетат (75:25) – ГМН Pulsatilla; хлороформ–метанол (3:1) – ГМН Phytolacca; бутанол–кислота уксусная–вода (4:1:2) – Thuja, Sabina, Taraxacum. Готовые хроматограммы наблюдали в УФ–свете, без проявления, и при обработке парами аммиака, 10 % раствором калия гидроксида, 20 % раствором серной кислоты (сушильный шкаф t=110С, 10'), 2 % спиртовым раствором алюминия хлорида (сушильный шкаф t=100–105С, 2–3'), 20 % спиртовым раствором тимола и разведенной серной кислотой (сушильный шкаф t=80С, 5'). Результаты представлены на примере ГМН Sabina и ее разведений в таблице 2.

Таким образом, с помощью хроматографии проводят идентификацию основных БАВ ГМН и разведений (1Д – 2Д). Из приведенных данных видно, что ГМН Sabina содержит тритерпеновые сапонины, флавоноиды, кумарины, фенолкарбоновые кислоты.

Спектры поглощения ГМН в УФ–области регистрировали на спектрометре “Perkin–Elmer Lambda 14 (1.3), в кювете с толщиной слоя 1 см, в области длин волн 220–400 нм. Как раствор сравнения использовали 45 % этиловый спирт (ГМН1, ГМН5) и 60 % этиловый спирт (ГМН2, ГМН3, ГМН4).
ИК–спектр образцов ГМН в таблетке калия бромида в области 4000–400 см-1 регистрировали на приборе марки “Perkin-Elmer-325”. Данные по некоторым матричным настойкам представлены в таблице 3.

Полученные данные могут быть использованы при оценке качества матричных настоек.

Количественное определение исходных растворов солей Argentum nitricum и Kalium carbonicum, а также их разведений (до 4Д) возможно проводить с использованием методов, указанных в фармакопейных статьях на данные соли. При этом содержание вещества (х, г) рассчитывают на


Таблица 2
Результаты хроматографических исследований ГМН “Sabina” и ее разведений

Объекты исследования	Восходящая хроматография в системе БУВ (4:1:2)
	№ пятен	Значение hRf	Цвет пятен в УФ–свете	Цвет пятен в УФ–свете после проявления
				10% спирт. р-р КОН	20% H2SO4, t	2% спирт. р-р AlCl3, t
ГМН “S”	1 2 3 4 5 6 7	38 48 85 97 76 88 59	светло-голубое голубое буро-желтое красное - - -	- - желтое - ярко-голубое ярко-голубое -	желто-коричневое - - - - - голубовато-фиол.	- ярко-голубое ярко-желтое - - - -
1Д	Пятна одинаковые, но цвет их до и после проявления менее яркий
2Д (УП в 10 раз)	1 2 3 4 5 6 7	38 48 85 97 76 88 59	- голубое - красное - - -	- - желтое - ярко-голубое ярко-голубое -	- - - - - - -	- - ярко-желтое - - - -
3Д (УП в 20 раз)	1 2 3 4 5 6 7	светло-коричневое - - - - 88 -	- - - - - - -	- - - - - голубое -	- - - - - - -	- - - - - - -

Примечание: (УП) – жидкость упарена.
Таблица 3
Спектральные характеристики ГМН

Объект исследования	УФ–спектр	ИК–спектр
ГМН “Sabina”	максимум при =282 нм, плечо при 310-320 нм	максимумы поглощения: 875 см-1, 1230 см-1, 1370 см-1, 1450 см-1, 1685 см-1, 1970 см-1
ГМН “Taraxacum”	плечи при 260–270 нм и при 310–320 нм	Максимум поглощения 1375 см-1

массу его навески (1 г) в разных разведениях, независимо от приготовленного объема по формуле

, где

V ­– объем титранта (мл);
К – поправочный коэффициент;
Т – титр по определяемому веществу;
В – гомеопатическое разведение (1Д – В=10; 2Д – В=100; 3Д – В=1000);
а – масса навески [8].

В случае если соли металлов, используемые в гомеопатии, не входят в перечень фармакологических субстанций, и методы их анализа, в том числе количественного, отсутствуют в фармакопейных статьях, мы использовали экстракционно–спектрофотометрический метод определения гомеопатических разведений (1Д – 4Д) солей калия и серебра, который проводили с помощью экстракционных систем, состоящих из краун–эфира, красителя и органической фазы [1]. Для солей калия использовали систему 18–краун–6–тропеолин 000–ІІ/хлороформ; для солей серебра – 15–краун–5–бромкрезоловый зеленый/хлороформ. В качестве раствора сравнения использовали хлороформную вытяжку контрольного опыта. Параллельно определяли оптическую плотность хлороформной вытяжки раствора рабочего стандартного образца (РСО) соли, с заведомо известной концентрацией.

Содержание вещества в гомеопатическом разведении минеральной соли (х, г) рассчитывали по формуле:
, где
Ах – оптическая плотность хлороформной вытяжки исследуемого образца;
С – содержание соли в 1 мл раствора РСО;
В – гомеопатическое разведение;
А0 ­– оптическая плотность хлороформной вытяжки раствора РСО.

Проведенные исследования свидетельствуют о возможности определения гомеопатических раз-ведений (1Д – 4Д) минеральных солей с помощью экстракционных систем краун–эфир–краситель / органическая фаза без проведения предварительного концентрирования.

Выводы.
1. Определены общие показатели, по которым оценивают качество гомеопатических лекарственных средств растительного и минерального происхождения.
2. С помощью качественных цветных реакций, хроматографических и спектральных методов анализа определяют основные действующие вещества гомеопатических матричных настоек, даже во втором десятичном разведении.
3. Экстракционно–спектрофотометрический метод количественного определения содержания минеральных солей в их гомеопатических разведениях (1Д – 4Д) с использованием краун–эфиров и красителей, может применяться при оценке их качества.

Литература:
1.Ветютнева Н.О. Краун–сполуки у фармацевтичному аналізі і стандартизації гомеопатичних розведень: Автореф. дис. ... д-ра фарм. наук. – К., 1997. – 44 с.
2.Державний реєстр лікарських засобів України / Голов. ред. Н.І. Шарикіна.– К., 1996. – 363 с.
3.Гомеопатические лекарственные средства в Германии и Европе: законодательные требования к регистрации и выдаче разрешения на продажу // Фармакологічний вісник.– 1999. – №2.– С. 14–18.
4.Гомеопатические лекарственные средства. Руководство по описанию и изготовлению гомеопатических лекарств / Под ред. В.И. Рыбака. – М.: Моск. науч. о-во врачей гомеопатов, 1967. – 371 с.
5.Государственная фармакопея СССР : Вып.1. Общие методы анализа / МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1987. – 336 с.
6.Государственная фармакопея СССР : Вып.2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1989. – 400 с.
7.Государственная фармакопея СССР. – 10-е изд. – М.: Медицина, 1968. – 1079 с.
8.Методические рекомендации по анализу лекарственных средств, изготовляемых в гомеопатических аптеках: Вып. 1 за 1989 г. / ВМЦФ. – Москва, 1989. – 32 с.

Методологічні підходи до оцінки якості гомеопатичних лікарських засобів рослинного та мінерального походження. Н.О. Вєтютнєва, О.О. Москаленко (Київ, Україна)
Стаття містить експериментальні дані по розробці методів аналізу контролю якості гомеопатичних лікарських засобів рослинного та мінерального походження. Оцінка якості проводиться з використанням якісних кольорових реакцій, хроматогра-фічних та спектральних методів аналізу. Одержані дані є основою для розробки норма-тивно-технічної документації на гомеопатичнo